这个伟大的房间源于旧美第奇剧院的先例，保留了原来的封面。它是画廊中最着名的艺术家之一，因为它收藏了Quattrocento近几十年创作的一些文艺复兴时期的杰作。
10-14号室：波提切利大厅
波提切利房间是10-14号房间的统一广场，收藏了桑德罗波提切利大师的作品世界上最好的收藏，包括他的杰作，Primavera和着名的维纳斯诞生，这两个复杂的新柏拉图式文化的两个标志性作品在十五世纪下半叶在佛罗伦萨发展起来。这些作品是在十五世纪八十年代制作的，是意大利文艺复兴时期亵渎主题的第一部大作品。他们被画给洛伦佐德梅迪奇（不是洛伦佐的壮丽，但他的住在别墅di Careggi，其中，他并没有运行良好的血液，他的表弟）。
在这个房间里，你可以追溯到主人的整个绘画演变，优雅的麦当娜在撒拉弗的荣耀和玛丹娜德尔罗塞托，更多的年轻作品仍然与菲利波里皮和维罗基奥的风格相关联，与一个男人的肖像科西莫韦奇奥（Cosimo il Vecchio，1475年）的奖章，其风格的成熟可能与研究佛兰德作品的现实主义有关，也可能与神话作品有关，如移动的帕尔拉德和半人马，人类本能的寓言分为理性和冲动，但是从神圣的智慧引导。
在波多切利的十五件作品中，最着名的是“春天”和“维纳斯的诞生”，这是意大利文艺复兴时期大型亵渎主题的第一批作品，它证明了佛罗伦萨在洛伦佐大帝时代的文化氛围。
不寻常的强度也是他的神圣主题的绘画，如圣伯纳贝祭坛，或精彩的圣母玛利亚。
随着16世纪的到来，吉罗拉莫萨沃纳罗拉的超宗教反动浪潮开始在佛罗伦萨社会中变得越来越紧迫，这在当时的所有艺术家中或多或少地逐渐体现出来。即使波提切利在经过像玛丹娜麦当劳这样奢侈的工作之后，开始采用更自由的风格，从十五世纪早期的几何清晰度中解脱出来（圣巴拿巴祭坛的麦当娜德拉梅洛格拉纳），加上一些古老的实验，如圣母加冕典礼主人回到金色的背景，似乎受到但丁的阅读启发。萨沃纳罗尔讲道最黑暗的时期在他的绘画中带来了悲观神秘主义的明确风向：Calunnia（1495）象征着乐观的人文主义精神的失败，观察到了人的基础性和真相的降级。
但这个房间还包含许多其他杰作：Portinari三联画的位置，一幅由Hugo van der Goes创作的佛兰德作品，约1475年由位于布鲁日的Medici公司的一位银行家带来，该作品以其对周围作品的正式独特性，特别适合。以及这件作品在十五世纪后半叶的佛罗伦萨艺术圈中所产生的闪烁流星的效果。然而，仔细观察后，我们开始掌握后来作品的亲和力，对细节的更多关注，由于佛罗伦萨油画家试图模仿的油画而产生的更好的发光效果，甚至复制佛兰德斯作品的某些元素，比如多梅尼科Ghirlandaio在类似的圣诞老人Trinita大教堂的牧羊人崇拜的明确致敬。
佛兰德的另一部作品是罗杰·范德维登（约1450年）的坟墓中的沉积作品，其作品由Beato Angelico的一幅作品展示，证明了佛兰德和佛罗伦萨大师之间的相互交流。
Domenico Ghirlandaio也注意到了北欧文化的影响，该房间由三幅画作代表。
乌菲兹美术馆
画廊完全占据了建于1560年至1580年间由Giorgio Vasari设计的大型建筑的一楼和二楼。它以其出色的古代雕塑和绘画作品（从中世纪到现代）而闻名世界。 14世纪和文艺复兴时期的绘画收藏品包括一些绝对的杰作：乔托，西蒙娜·马提尼，皮耶罗·德拉·弗朗切斯卡，贝亚托·安吉利科，菲利波·里皮，波提切利，曼泰尼亚，科雷焦，莱昂纳多，拉斐尔，米开朗基罗和卡拉瓦乔等。欧洲画家的珍贵作品（主要是德国，荷兰和佛兰德语）。
此外，画廊还收藏了来自Medici家族的古代雕像和半身雕像，这些家具装饰走廊，并由失去的希腊雕塑的古罗马复制品组成。