O corredor oeste abriga outras salas que enfrentam diretamente. Estes quartos, após a abertura dos novos quartos no piso térreo, são quase todos re-terminados. O quarto Niobe foi fechado da primavera de 2011 a 21 de dezembro de 2012 devido a trabalhos de restauração.
Quarto 35 Contra-Reforma Barroca e Toscana
O Quarto 35 é dedicado a Federico Barocci e à Contra-Reforma na Toscana, com inúmeros exemplos dos principais expoentes da época. O grande retábulo da Madonna del Popolo se destaca do Barocci.
Sala 38 Exposições temporárias
Quarto 39-40 Lobby de Partida
O quarto 40 era anteriormente o vestíbulo de saída do museu. Existem vários exemplos de estatuetas clássicas e algumas pinturas, incluindo uma bandeira de dois lados de Sodom.
Quarto 41 Rubens
O quarto 41 já estava dedicado a Rubens e agora é usado como um armazém.
Quarto 42 Niobe Room
O quarto grandioso 42 foi construído pelo arquiteto Gaspare Maria Paoletti no final do século XVIII para abrigar as numerosas estátuas do grupo Niobìdi, uma série de estátuas romanas, uma cópia dos originais helenísticos trazidos a Florença naqueles anos. O mito de Niobe e seus filhos está ligado ao amor materno, o que levou a infeliz a se gabar tanto de sua prole (sete homens e sete mulheres) para ser comparada a Latona, mãe de Apolo e Artemisa, provocando a ira de alguns que se vingaram matando as crianças uma a uma. As esculturas vieram à luz em Roma em 1583 e faziam parte dos aparelhos decorativos da Villa Medici (comprados pelo cardeal Ferdinando), dos quais foram transferidos para Florença em 1781, onde foram exibidos diretamente nesta sala. Das pinturas enormes nas paredes, duas são de Rubens (parte do ciclo incompleto de Henry IV da França), uma de Giusto Sustermans e uma de Giuseppe Grisoni.
Quarto 43 italiano e europeu do século XVII
Quarto 43, já no século XVII, italiano e europeu, agora abriga apenas um grupo muito seleto de obras italianas, depois que os estrangeiros foram transferidos para os “quartos azuis” no primeiro andar. Annibale Carracci, Domenichino, Guercino, Mattia Preti, Bernardo Strozzi e outros estão representados.
Quarto 44 Rembrandt e pintura flamenga do século XVII
O quarto 44 (Rembrandt e o flamengo) está sendo reconstruído, enquanto os 45 (do século XVIII) foram integrados com outras obras italianas depois que os estrangeiros foram transferidos para o primeiro andar. São destaque as obras de Canaletto, Giambattista Tiepolo, Francesco Guardi, Alessandro Magnasco e Rosalba Carriera. Importante para tamanho e qualidade é a tela de Amor e Psicologia de Giuseppe Maria Crespi.
Quarto 45º Século italiano e europeu
O ambiente adjacente é o do bar, que leva ao terraço acima da Loggia dei Lanzi, um excelente ponto de vista para Piazza della Signoria, Palazzo Vecchio e Dome de Brunelleschi. A pequena fonte de terraço contém uma cópia do Nano Morgante que monta um caracol, de Giambologna, hoje no Bargello, mas originalmente criado para este site. O bar também leva à nova escadaria, inaugurada em dezembro de 2011, que leva aos quartos no primeiro andar.
Galeria Uffizi
A Galeria ocupa inteiramente o primeiro e segundo andares do grande edifício construído entre 1560 e 1580 e desenhado por Giorgio Vasari. É famoso em todo o mundo por suas extraordinárias coleções de esculturas e pinturas antigas (da época da Idade Média ao Modern). As coleções de pinturas do período do século XIV e do Renascimento incluem algumas obras-primas absolutas: Giotto, Simone Martini, Piero della Francesca, Beato Angelico, Filippo Lippi, Botticelli, Mantegna, Correggio, Leonardo, Raffaello, Michelangelo e Caravaggio, além de muitos obras preciosas de pintores europeus (principalmente alemães, holandeses e flamengos).
Além disso, a Galeria possui uma inestimável coleção de estátuas antigas e bustos da família Medici, que adorna os corredores e consiste em cópias romanas antigas de esculturas gregas perdidas.